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  • 中科院生物物理所在超分辨顯微鏡研制領(lǐng)域取得進(jìn)展

    作者:佚名 來源:生物物理研究所 時(shí)間:2021-04-02 23:41 閱讀:804 [投稿]
    提出一種軸向單分子定位成像新技術(shù),并研制出新型干涉定位顯微鏡(ROSE-Z),把單分子定位成像的軸向分辨率提升到納米尺度。

    基于單分子定位的超分辨顯微成像技術(shù)自2006年提出以來發(fā)展迅速,該技術(shù)巧妙利用特殊熒光分子的光開關(guān)特性,結(jié)合單分子成像和質(zhì)心擬合算法,繞過衍射現(xiàn)象的限制,把熒光顯微鏡的分辨率提高了一個(gè)數(shù)量級,解析了眾多未知的細(xì)胞納米結(jié)構(gòu),提升了對細(xì)胞結(jié)構(gòu)的認(rèn)知。但長期以來,受定位原理的限制,其軸向分辨率比側(cè)向低2-3倍(一般為50 nm左右),影響了其三維解析能力和應(yīng)用。

    中國科學(xué)院院士、生物物理所研究員徐濤課題組與研究員紀(jì)偉課題組在Nature Methods上,發(fā)表了題為Molecular-scale axial localization by repetitive optical selective exposure的研究論文,提出一種軸向單分子定位成像新技術(shù),并研制出新型干涉定位顯微鏡(ROSE-Z),把單分子定位成像的軸向分辨率提升到納米尺度。

    課題組在2019年突破單分子定位顯微鏡側(cè)向分辨率后的延伸研究(Nature Methods),繼上個(gè)工作把側(cè)向分辨極限推進(jìn)到3 nm后,該工作通過引入非對稱干涉光路,進(jìn)一步在新的維度上突破了軸向分辨率的極限,比傳統(tǒng)的柱面鏡成像方法提高6倍以上定位精度。利用ROSE-Z顯微鏡,團(tuán)隊(duì)對細(xì)胞樣品進(jìn)行了納米精度三維雙色成像,并驗(yàn)證了細(xì)胞厚樣品成像能力,證明該方法具備優(yōu)異的軸向分辨率及操作便捷性,可促進(jìn)細(xì)胞納米結(jié)構(gòu)的研究。


    上圖:ROSE-Z定位原理,左下:ROSE-Z與柱面鏡成像PSF比較,右下:ROSE-Z與柱面鏡成像定位精度比較


    ROSE-Z對微管中空結(jié)構(gòu)解析

    徐濤和紀(jì)偉為論文共同通訊作者,高級工程師谷陸生、工程師李媛媛、博士生張淑文為論文共同第一作者。研究工作得到國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃、國家自然科學(xué)基金委員會(huì)、中科院戰(zhàn)略性先導(dǎo)科技專項(xiàng)(B類)"生物大分子復(fù)合體結(jié)構(gòu)與功能的跨尺度研究"以及北京市科學(xué)技術(shù)委員會(huì)等的資助。

    論文鏈接:https://dx.doi.org/10.1038/s41592-021-01099-2

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