使用顯微鏡觀察生物樣本時(shí)，如果物鏡透鏡所處的介質(zhì)與樣本不同，光束就會受到干擾。例如，當(dāng)用被空氣包圍的透鏡觀察水樣時(shí)，光線在透鏡周圍的空氣中比在水中彎曲得更厲害。

這種干擾會導(dǎo)致測量的樣品深度小于實(shí)際深度。因此，樣品看起來變平了。

"這個(gè)問題由來已久，從上世紀(jì) 80 年代開始，人們就提出了一些理論來確定一個(gè)用于確定深度的校正系數(shù)。然而，所有這些理論都假定這一系數(shù)是恒定的，與樣本深度無關(guān)。代爾夫特理工大學(xué)的雅各布-霍根布姆（Jacob Hoogenboom）副教授解釋說："盡管后來的諾貝爾獎(jiǎng)獲得者斯特凡-海爾（Stefan Hell）在上世紀(jì) 90 年代指出，這一比例可能與深度有關(guān)，但還是出現(xiàn)了這種情況。

代爾夫特理工大學(xué)的前博士后謝爾蓋-洛格諾夫（Sergey Loginov）現(xiàn)在已經(jīng)通過計(jì)算和數(shù)學(xué)模型證明，樣品在靠近透鏡的地方確實(shí)比遠(yuǎn)離透鏡的地方呈現(xiàn)出更強(qiáng)烈的扁平化。博士生 Daan Boltje 和博士后 Ernest van der Wee 隨后在實(shí)驗(yàn)室證實(shí)，矯正因子與深度有關(guān)。

這項(xiàng)研究成果發(fā)表在《光學(xué)》（Optica）雜志上。

最后一位作者 Ernest Van der Wee 說："我們已將結(jié)果匯編成一個(gè)網(wǎng)絡(luò)工具和軟件，隨文章一起提供。有了這些工具，任何人都可以為自己的實(shí)驗(yàn)確定精確的校正因子"。

研究員 Daan Boltje 說：“部分歸功于我們的計(jì)算工具，我們現(xiàn)在可以非常精確地從生物系統(tǒng)中切出蛋白質(zhì)及其周圍環(huán)境，用電子顯微鏡確定其結(jié)構(gòu)。這種顯微鏡檢查非常復(fù)雜、耗時(shí)，而且費(fèi)用高得驚人。因此，確保觀察到正確的結(jié)構(gòu)非常重要�！�

研究人員 Daan Boltje 說：“有了我們更精確的深度測定，我們只需在錯(cuò)過生物目標(biāo)的樣本上花費(fèi)更少的時(shí)間和金錢。最終，我們可以研究更多相關(guān)的蛋白質(zhì)和生物結(jié)構(gòu)。而確定生物系統(tǒng)中蛋白質(zhì)的精確結(jié)構(gòu)，對于了解并最終防治異常和疾病至關(guān)重要。"

在提供的網(wǎng)絡(luò)工具中，您可以填寫實(shí)驗(yàn)的相關(guān)細(xì)節(jié)，如折射率、物鏡的孔徑角和所用光線的波長。然后，該工具會顯示與深度相關(guān)的縮放因子曲線。您還可以導(dǎo)出這些數(shù)據(jù)供自己使用。此外，您還可以將結(jié)果與現(xiàn)有理論的結(jié)果結(jié)合起來繪制。

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