日本京都大學(xué)Michiyuki Matsuda團隊開發(fā)出在活體雙光子（2P）光遺傳學(xué)中，熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）輔助的黃素蛋白的光活化技術(shù)。相關(guān)論文2019年9月9日在線發(fā)表在《自然—方法學(xué)》上。 2i)y'+s  
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研究人員介紹，現(xiàn)有的光學(xué)二聚體以優(yōu)化信號傳導(dǎo)為途徑，但它們在體內(nèi)的用途有限，部分原因是它們在2P激發(fā)下的低效活化。 pqK3u)  
*)1,W+A5L  
為了克服這一問題，研究人員開發(fā)了FRET輔助光活化技術(shù)，或稱為FRAPA。在2P激發(fā)下，mTagBFP2有效地吸收能量并將能量轉(zhuǎn)移到CRY2的發(fā)色團�；�于結(jié)構(gòu)引導(dǎo)工程，開發(fā)了具有40％FRET效率的嵌合蛋白，并命名為2P激活的CRY2或2paCRY2。2paCRY2用于開發(fā)名為2paRAF的RAF1激活系統(tǒng)。在表達(dá)2paRAF的三維培養(yǎng)細(xì)胞中，細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶（ERK）在單細(xì)胞分辨率下通過2P激發(fā)被有效激活。在表達(dá)2paRAF的小鼠的表皮細(xì)胞中也完成了ERK的光激活。他們進(jìn)一步開發(fā)了mTFP1融合的LOV結(jié)構(gòu)域，其表現(xiàn)出對2P激發(fā)的有效響應(yīng)�？偟膩碚f，F(xiàn)RAPA將為體內(nèi)單細(xì)胞光學(xué)信號傳導(dǎo)途徑控制鋪平道路。 v\c3=DbO  
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原文鏈接：https://www.nature.com/articles/s41592-019-0541-5