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    [分享]顯微鏡基本光學(xué)參數(shù)介紹 [復(fù)制鏈接]

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    只看樓主 倒序閱讀 樓主  發(fā)表于: 2020-06-24
    顯微鏡光學(xué)性能是由顯微鏡的光學(xué)參數(shù)或者說參量來決定的,而基本的顯微鏡參數(shù)有哪些呢?本文總結(jié)了八個(gè)基本的參數(shù): OYWHiXE6]  
    v36Z*I6)5  
    1.數(shù)值孔徑 rt*>)GI]b  
    5K?/-0yG  
    數(shù)值孔徑又叫鏡口率。它是指所觀察的物體與鏡頭間介質(zhì)的折射率n與物鏡鏡口角α一半的正弦值的乘積。用N.A或A.來表示。即:N.A.=nsin(α/2)。 8,h!&9  
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    所謂鏡口角是指被觀察點(diǎn)射入物鏡前透鏡的邊緣光線之間的夾角。 K5`*Y@  
    G~&8/ s  
    2o[ceEg  
    即圖10-1-2中的角α
    ~};q/-[r  
    數(shù)值孔徑是物鏡與聚光鏡的重要參數(shù),與顯微鏡的其它各個(gè)光學(xué)參數(shù)都有密切關(guān)系。一般希望它越大越好。從公式中可知:提高數(shù)值孔徑有兩種方法,一是增大鏡口角,二是增大物鏡與標(biāo)本之間的折射率。 l0t(t*[Mj  
    l-c:'n  
    采取前一種方法時(shí),可以讓標(biāo)本與物體盡量靠近。但無論怎樣靠近,α總是小于180°。這樣,sin(α/2)也小于1。而空氣的折射率n=1。因此,干燥系物鏡的數(shù)值孔徑nsin(α/2)總是小于1,一般在0.04~0.95之間。 eF7I 5k4  
    d:A'|;']  
    采取后一種方法時(shí),可在物鏡與標(biāo)本之間加入折射率較大的介質(zhì)。如香柏油的折射率n=1.515,使用香柏油為介質(zhì)時(shí),可使數(shù)值孔徑達(dá)到1.2以上。這就是為什么在有些情況下要使用油鏡的原因。目前油鏡所能達(dá)到的最大數(shù)值孔徑為1.4。 VR"le&'z"  
    |"Zf0G  
    2.分辨率 *v8daF  
     <{ v %2  
    分辨率又叫鑒別率或分辨本領(lǐng)。所謂分辨率是指顯微鏡分辨被檢物體細(xì)微結(jié)構(gòu)的能力。它與分辨距離成反比。分辨距離是指能被分辨開的兩物點(diǎn)間的最小距離。分辨距離越小,顯微鏡的分辨率越高。如果兩物點(diǎn)間的距離小于分辨距離,就會(huì)把兩點(diǎn)誤看成一點(diǎn),無法看清其結(jié)構(gòu)。顯微鏡的分辨率是由物鏡決定的。目鏡只起放大作用,不能增加顯微鏡的分辨率。 sb_/FE5e  
    WB'1_a  
    在普通中心照明的情況下,物鏡的分辨距離d由下式?jīng)Q定。 qo \9,<  
    rrgOp5aV"  
    d=(λ/2)N.A. $A,YQH+  
    [h B$%i]\<  
    式中:d表示分辨距離, 單位是微米,λ表示照明光線的波長,單位也是微米。 /L(}VJg-  
    2)$-L'YS  
    在可見光中,亮度最大而且對人眼最敏感的波長為0.55μm,物鏡最大的N. A.為1.4。代入上式可得d近似為0.2μm。即,使用普通光學(xué)顯微鏡,在中心照明的情況下,分辨距離的極限為0.2μm。也就是說,小于0.2μm的兩物體,普通光學(xué)顯微鏡無法區(qū)分。 &k_LK  
    znWB.H  
    使用紫外線,可以減小照明光線的波長,能使分辨距離達(dá)到0.1μm。但因紫外線不能為人眼所見。只能拍成照片后再觀察。 m-~3c]pA  
    F_w+8)DZ  
    電子流的波長只有0.00387nm。利用“電子透鏡”或磁透鏡來控制電子流,所制成的電子顯微鏡的分辨距離達(dá)零點(diǎn)幾nm?梢杂盟ビ^察原子的結(jié)構(gòu)。 )+,h}XqlX  
    wmR~e  
    3.放大率 P =Q+VIP&  
    \pI {b9  
    顯微鏡的放大率等于物鏡的放大率和目鏡的放大率的乘積。從原理上講,放大率可以做的非常大。但是,如果標(biāo)本的細(xì)節(jié)不能被物鏡分辨開來,放大的再大,也毫無意義。理論上可以推導(dǎo)出來,顯微鏡最合適的放大率(稱為有效放大率,用M有效表示)是在物鏡的數(shù)值孔徑的500~1000倍之間。即500N.A.≤M有效≤1000N.A. =5^1Bl  
    <9xr? i=  
    在有效放大率范圍內(nèi),眼睛可以長時(shí)間觀察而不易疲勞。如果放大率低于500 N.A.,觀察起來就很吃力。如果高于1000N.A.,則會(huì)使像質(zhì)變壞,甚至造成不真實(shí)的像。因此,超過1000N.A.的放大率稱為無效放大率。 oz]3 Tx  
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