| 鄭飛 |
2021-04-22 11:09 |
多重定量PCR系統(tǒng)中多色熒光檢測(cè)和光譜串?dāng)_校正方法
多色熒光的激發(fā)檢測(cè)光路是多重定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（ＰＣＲ）系統(tǒng)的核心組成部分。根據(jù)系統(tǒng)對(duì)熒光激發(fā)的均一性、熒光檢測(cè)的時(shí)間和靈敏度需求，提出一種基于磁光開關(guān)和光電倍增管（ＰＭＴ）的多色熒光激發(fā)檢測(cè)光路。通過(guò)四色 ＬＥＤ單獨(dú)激發(fā)和 ＰＭＴ檢測(cè)來(lái)提高靈敏度；利用磁光效應(yīng)實(shí)現(xiàn)光路的電控切換，配合一維掃描機(jī)構(gòu)和濾光片切換裝置，完成９６孔標(biāo)準(zhǔn) ＰＣＲ板的四色熒光掃描。該設(shè)計(jì)避免了多色熒光光路的系統(tǒng)串?dāng)_。由于熒光染料本身光譜特性產(chǎn)生的熒光光譜串?dāng)_是通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)迭代的四維聚類分析算法計(jì)算串?dāng)_矩陣，并通過(guò)４種常用染料的實(shí)驗(yàn)研究，對(duì)所建熒光檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行熒光光譜串?dāng)_評(píng)估。
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