光學(xué)分析法是利用待測定組分所顯示出的吸收光譜或發(fā)射光譜，既包括原子光譜也包括分子光譜。利用被測定組分中的分子所產(chǎn)生的吸收光譜的分析方法，即通常所說的可見與紫外分光光度法、紅外光譜法；利用其發(fā)射光譜的分析方法，常見的有熒光光度法。利用被測定組分中的原子吸收光譜的分析方法，即原子吸收法；利用被測定組分的發(fā)射光譜的分析方法，包括發(fā)射光譜分析法、原子熒光法、X射線原子熒光法、質(zhì)子熒光法等。 8dv1#F|  
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（一）比色法 KLk37IY2\  
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分光光度法的前身是比色法。比色分析法有著很長的歷史。1830年左右，四氨絡(luò)銅離子的深藍(lán)色就被用于銅的測定。奈斯勒的氨測定法起源于1852年，大約在同一年，硫氰酸鹽被用來分析鐵。1869年，舍恩報(bào)道說鈦鹽與過氧化氫反應(yīng)會產(chǎn)生黃色，1882年，韋勒（Weller）將此黃色反應(yīng)改進(jìn)成一種鈦的比色法。釩也能與過氧化物發(fā)生類似的反應(yīng)，生成一種橙色絡(luò)合物。1912年，梅勒一方面利用1908年芬頓發(fā)現(xiàn)的一個反應(yīng)（二羥基馬來酸與鈦反應(yīng)呈橙黃色，與釩反應(yīng)無此色），另一方面利用與過氧化物的反應(yīng)，得出了一種鈦和釩這兩種元素的比色測定法。 v{9eEk1  
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吸收光度分析法提供了非化學(xué)計(jì)量法的一個很好例子。有色化合物的光吸收強(qiáng)弱隨著所用輻射波長的大小而變化。因此早期的比色法主要憑經(jīng)驗(yàn)將未知物與濃度近似相等的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行對比。比如象奈斯勒在氨測定法中所作的比較。比色劑，如杜波斯克比色計(jì)，是通過改變透光溶液的厚度和利用比爾定律，來對未知物的顏色與標(biāo)準(zhǔn)液的濃度進(jìn)行對比的，這種儀器并不適用于所有的有色物質(zhì)，它充其量也不過經(jīng)驗(yàn)程度很高罷了。 `c icjA@~  
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1729年，P·布古厄（Bouguer）觀察到入射光被介質(zhì)吸收的多少與介質(zhì)的厚度成正比。這后來又被J·H·蘭貝特（Lambert，1728—1777）所發(fā)現(xiàn)，他對單色光吸收所作的論述得到了下列關(guān)系式： TM+7>a$  
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上式中I是通過厚度為x的介質(zhì)的光密度，a是吸收系數(shù)。利用邊界條件x=0時，I=I0，積分得到： gP}M\3-O  
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1852年，A·比爾（Beer）證實(shí)，許多溶液的吸收系數(shù)a是與溶質(zhì)的濃度C成正比的。盡管比爾本人沒有建立那個指數(shù)吸收定律公式，但下列關(guān)系式 bV"0}|A~K  
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仍被叫做比爾定律，式中濃度和厚度是作為對稱變數(shù)出現(xiàn)的。這個名稱似乎是在1889年就開始使用了。 'F@'4[uda  
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1940年以前，比色法一直是最直觀的分析法，往往是以高度經(jīng)驗(yàn)為根據(jù)的——實(shí)際上依靠了奈斯勒管、杜波斯克比色計(jì)和拉維邦色調(diào)計(jì)。色調(diào)計(jì)利用可疊加有色玻璃盤作為顏色比較的載片。某些測定甚至是將顏色與彩紙和有色玻璃作比較來進(jìn)行的。T·W·理查茲在有關(guān)鹵化銀的測定方面，發(fā)明了一種散射濁度計(jì)，用通過微濁溶液來測量光散射。 M8h
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1940年初左右，分光光度計(jì)開始廣泛使用，幾種高質(zhì)量、應(yīng)用簡便的工業(yè)儀器使比色法更加普及，最著名的儀器，如蔡斯—普爾費(fèi)利希、希爾格、斯佩克爾、貝克曼和科爾曼分光光度計(jì)，采用濾波器、棱鏡和光柵，使光的波長限制在一個很窄的范圍內(nèi)。光吸收一般是用光電管測量的。 %bAv.'C  
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典型的比色試劑是二苯基硫卡巴腙（diphenyl-thiocarbazone）通常叫做雙硫腙dithizone，是艾米爾·費(fèi)歇爾在1882年發(fā)現(xiàn)的，他觀察到雙硫腙很容易和金屬離子形成有色化合物，但他沒有繼續(xù)這項(xiàng)研究。1926年，海爾穆特·費(fèi)歇爾研究了這個化合物，并報(bào)道了把它用于分析的可能性，這種可能性在30年代得到了最充分的利用。這種試劑與大量陽離子所形成的有色螯合物極易溶解于氯仿那樣的有機(jī)溶劑中。于是，這種絡(luò)合物就可從大量的水溶液中萃取到少量的溶劑中，從而使這種方法對痕量物質(zhì)也非常靈敏。 q|~9%Pujg  
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比色法借助儀器可用于波長短到2000Å的紫外區(qū)。向紫外區(qū)的進(jìn)一步擴(kuò)展是不可能的。因?yàn)槿萜�、棱鏡及空氣本身也會吸收光。記錄方法（起初主要是照相記錄），隨著實(shí)用光電管的發(fā)展得到了明顯的改進(jìn)。紫外分光光度法在測定芳香化合物，如苯酚、蒽和苯乙烯方面特別有價(jià)值。 yJ^
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紫外吸收在研究有機(jī)化合物的結(jié)構(gòu)時也很有用，它同束縛松散的電子締合，如出現(xiàn)在雙鍵中的電子。乙烯、乙炔、羰基化合物和氰化物中的不飽和鍵吸收2000Å以下的光，因此處于紫外分光光度計(jì)可測范圍之外。不飽和鍵周圍有取代基時，會使光的吸收向長波方向移動，但仍遠(yuǎn)離實(shí)際可測的范圍。偶氮基、硝基、亞硝酸鹽、硝酸鹽和亞硝基的吸收光范圍在2500～3000Å之間。不飽和鍵發(fā)生共軛現(xiàn)象會使吸收增強(qiáng)。引起光向長波方向移動。芳香環(huán)具有一個特征吸收本領(lǐng)，可用于鑒定。 g;-CAd5  
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（二）紅外光譜法 pvX\kX3}  
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輻射能吸收用作一種分析工具的最大進(jìn)展也許是在紅外光譜領(lǐng)域。1920年以前，利用波長在8000Å到幾十分之一毫米光譜區(qū)的儀器就已經(jīng)有了，但紅外光譜研究的真正進(jìn)展卻發(fā)生在1940年以后。這個光譜區(qū)含有象分子振動所包括的那樣一些頻率的光。原子質(zhì)量、鍵強(qiáng)和分子構(gòu)型這樣一些重要因素與所吸收的能量有聯(lián)系。因此某些波段易與OH、NH、C=C和C=O那樣一些基團(tuán)相對應(yīng)。 ~ ^K[pA ?  
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紅外光譜的興起靠的是發(fā)展熱電堆以及輻射計(jì)、放大器和記錄器方面所取得的進(jìn)展。許多年來，這些儀器的光學(xué)部分比檢測和記錄機(jī)構(gòu)要令人滿意得多。 G,J$lTX  
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紅外光譜主要是作為一種定性工具使用的。同時如果大量的日常分析工作——比如，工業(yè)實(shí)踐中常常必需的分析工作——證明紅外光譜有利于這種工作的操作的話，那么它也可用于定量分析。定量紅外光譜法已經(jīng)用于分析硝基烷混合物。甲酚混合物和六氯化苯異構(gòu)體方面。六氯化苯的γ—異構(gòu)體可用作殺蟲劑。紅外光譜法已經(jīng)是測定混雜有相關(guān)異構(gòu)體的γ—六氯化苯的有用工具。紅外光譜法在定性分析中極有價(jià)值，因?yàn)槲�收位置和吸收�?qiáng)度能提供大量數(shù)據(jù)。過去人們曾做了大量的工作，繪制了許多鍵和基的光吸收性質(zhì)圖，使得有可能利用這種數(shù)據(jù)迅速確定出新化合物的結(jié)構(gòu)。工業(yè)方面，紅外光譜也有助于研究聚合作用方面的進(jìn)展，因?yàn)閱误w和聚合體的紅外吸收帶相互間是有區(qū)別的。 8 }-"&-X  
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目前紅外光譜（IR）是給出豐富的結(jié)構(gòu)信息的重要方法之一，能在較寬的溫度范圍內(nèi)快速記錄固態(tài)、液態(tài)、溶液和蒸氣相的圖譜。紅外光譜經(jīng)歷了從棱鏡紅外、光柵紅外，目前已進(jìn)入傅里葉變換紅外（FT—IR）時期，積累了十幾萬張標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的圖譜。FT—IR具有光通量大、信噪比高、分辨率好、波長范圍寬、掃描速度快等特點(diǎn)。利用IR顯微技術(shù)和基本分離技術(shù)（matrixisolation，MI—IR）可對低達(dá)ng量和pg量級的試樣進(jìn)行記錄，F(xiàn)T—IR和色譜的結(jié)合，被稱為鑒定有機(jī)結(jié)構(gòu)的“指紋”，這些優(yōu)點(diǎn)是其他方法所難于比擬的。紅外光譜近年來發(fā)展十分迅速，在生物化學(xué)高聚物、環(huán)境、染料、食品、醫(yī)藥等方面得到廣泛應(yīng)用。 ,ujoGSx}  
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（三）熒光分析 "]sr4Jg=  
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當(dāng)紫外光照射到某些物質(zhì)的時候，這些物質(zhì)會發(fā)射出各種顏色和不同強(qiáng)度的可見光，而當(dāng)紫外光停止照射時，這種光線也隨之很快地消失，這種光線稱為熒光。 _Ab|<!a/R  
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第一次記錄熒光現(xiàn)象的是16世紀(jì)西班牙的內(nèi)科醫(yī)生和植物學(xué)家N.Monardes，1575年他提到在含有一種稱為“LignumNephriticum”的木頭切片的水溶液中，呈現(xiàn)了極為可愛的天藍(lán)色，在17世紀(jì)，Boyle（1626—1691）和Newton（1624—1727）等著名科學(xué)家再次觀察到熒光現(xiàn)象，并且給予更詳細(xì)的描述。盡管在17世紀(jì)和18世紀(jì)中還發(fā)現(xiàn)了其它一些發(fā)熒光的材料和溶液，然而在解釋熒光現(xiàn)象方面卻幾乎沒有什么進(jìn)展。直到1852年Stokes在考察奎寧和葉綠素的熒光時，用分光計(jì)觀察到其熒光的波長比入射光的波長稍為長些，才判明這種現(xiàn)象是這些物質(zhì)在吸收光能后重新發(fā)射不同波長的光，而不是由光的漫射作用所引起的，從而導(dǎo)入了熒光是光發(fā)射的概念，他還由發(fā)熒光的礦物“螢石”推演而提出“熒光”這一術(shù)語。Stokes還對熒光強(qiáng)度與濃度之間的關(guān)系進(jìn)行了研究，描述了在高濃度時以及外來物質(zhì)存在時的熒光猝滅現(xiàn)象。此外，他似乎還是第一個（1864年）提出應(yīng)用熒光作為分析手段的人。1867年，Goppelsröder）進(jìn)行了歷史上首次的熒光分析工作，應(yīng)用鋁—桑色素配合物的熒光進(jìn)行鋁的測定。1880年，Liebeman提出了最早的關(guān)于熒光與化學(xué)結(jié)構(gòu)關(guān)系的經(jīng)驗(yàn)法則，到19世紀(jì)末，人們已經(jīng)知道了包括熒光素、曙紅、多環(huán)芳烴等600種以上的熒光化合物。 LNe-]3wB  
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20世紀(jì)以來，熒光現(xiàn)象被研究得更多了。例如，1905年Wood發(fā)現(xiàn)了共振熒光；1914年Frank和Hertz利用電子沖擊發(fā)光進(jìn)行定量研究；1922年Frank和Cario發(fā)現(xiàn)了增感熒光；1924年Wawillous進(jìn)行了熒光產(chǎn)率的絕對測定；1926年Gaviola進(jìn)行了熒光壽命的直接測定等等。 Up8#Nz T  
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熒光分析方法的發(fā)展，與儀器應(yīng)用的發(fā)展是分不開的。19世紀(jì)以前，熒光的觀察是靠肉眼進(jìn)行的，直到1928年，才由Jette和West提出了第一臺光電熒光計(jì)。早期的光電熒光計(jì)的靈敏度是有限的，1939年Zworykin和Rajchman發(fā)明光電倍增管以后，在增加靈敏度和容許使用分辨率更高的單色器等方面，是一個非常重要的階段。1943年Dutton和Bailey提出了一種熒光光譜的手工校正步驟，1948年由Studer推出了第一臺自動光譜校正裝置，到1952年才出現(xiàn)商品化的校正光譜儀器。
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