為達(dá)到準(zhǔn)確測量的目的,需要了解測量過程的環(huán)境,影響因素及可使用材料的情況:
+m}Pmi$ 1.可能被用于標(biāo)記的熒光,光譜都較寬沒有銳線,準(zhǔn)確可知,可校驗(yàn)。無需分辨率很高的分析裝置。
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|+U<S~ 2.細(xì)胞存在自發(fā)熒光。
z5*=MlZ)R. 3.熒光強(qiáng)度與激發(fā)光強(qiáng)度相關(guān)。
a{[+<8=@1 4.由于熒光代表核內(nèi)物質(zhì)濃度,而細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)位置不固定,所以其空間放射是不均勻的,又由于細(xì)胞質(zhì)與體液雖有折射率差但不會很大,所以雖不均勻不會有過大的突變和大的量差異,這個只能通過實(shí)驗(yàn)獲得數(shù)據(jù)。
iU+nqY' 5.熒光本身很微弱。
AOp/d(vx5i 6.由于聚焦技術(shù),細(xì)胞在導(dǎo)流腔內(nèi)一定是延中心軸附近排列移動的,但測量時(shí)細(xì)胞在Z軸的位置是不固定的。
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JfG 7.測量細(xì)胞大小認(rèn)為是大多數(shù)的<100um。